2022-08-01
囊胚液检测技术分为取样和检测两部分,囊胚液取样过程又称囊胚穿刺术,是将1个ICSI移液管穿过位于囊胚ICM对侧的滋养外胚层,仔细抽出囊胚液致囊胚腔完全皱缩,从而分离出0.01μl左右的囊胚液,然后将获得囊胚液用于检测蛋白质、遗传物质和代谢物质来评估胚胎发育潜能。
1.囊胚液检测技术:(1)囊胚液检测蛋白质。Poli等利用囊胚液检测技术从每个囊胚腔中提取4~6nl囊胚液,通过串联质谱检测到288种蛋白质,其中182种为囊胚来源蛋白,并且发现囊胚液中H2A 和GAPDH水平能够预测胚胎核型,其准确性为100%。以上研究证明,使用靶向蛋白质组学技术可以在单个囊胚液中实现蛋白质的定量检测,囊胚中靶蛋白的丰富度与整个胚胎的染色体状态之间存在潜在关联。(2)囊胚液检测遗传物质。在囊胚液中的胚胎源性DNA能够提供适合遗传分析的DNA 模板。研究表明,在整倍体方面,囊胚液检测与TE活检、全囊胚活检、极体活检和卵裂球活检的一致率分别为97.4%、100%、93.3%和100%;在单条染色体方面,囊胚液检测与TE活检、全囊胚活检、极体活检和卵裂球活检的一致率分别为96.6%、98.1%、93.5和94%,说明囊胚液是一种很有前途的PGT替代来源。(3)囊胚液检测代谢物质。人们已经可以利用高效液相色谱-质 谱技术从低至5nl的囊胚液中高灵敏度检测出乳酸、葡糖-6-磷酸、酮戊二酸、磷酸葡萄糖酸三钠盐、谷氨酸、ATP、NAD+、NADH、NADPH等代谢产物,囊胚液的代谢产物检测可以成为评估胚胎发育潜能的辅助工具。
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