多项基于猪卵巢的研究显示，体外培养猪卵母细胞-颗粒细胞复合体的培养液mt-cfDNA、n-cfDNA含量与OGC颗粒细胞凋亡率呈显著正相关，而与卵母细胞体外MⅡ级成熟率呈负相关。抑制蛋白酶体后，猪卵巢颗粒细胞线粒体变性将导致培养液mt-cfDNA释放减少，抑制自噬则导致mt-cfDNA 在细胞中过量积累，使其释放到细胞外的浓度增加，抑制氧化磷酸化亦通过破坏卵丘细胞线粒体功能，导致mt-cfDNA释放增加。由上可知，颗粒细胞体外培养液mt-cfDNA的浓度可指示卵巢颗粒细胞自噬与线粒体功能，这亦为卵巢功能的早期评估提供了依据。综上所述，cfDNA（特别是mt-DNA）可反映卵巢颗粒细胞功能、凋亡、自噬水平与线粒体功能，亦可作为卵母细胞质量及发育能力的标志物，但其与卵巢反应性的关系尚待进一步研究。

cfDNA作为精液的重要成分，其在评估精子质量中发挥着重要作用。研究发现，畸精症与无精症患者精液的平均cfDNA浓度均显著高于正常精液。低浓度、低活力、形态差的精液亦常伴有cfDNA水平升高。而精液中的mt-cfDNA水平在少、弱精患者中明显降低，与精子存活率、活力和形态亦呈显著负相关，而与精子氧化应激水平呈正相关。精液mt-cfDNA亦会诱发精液中氧化应激水平的提高，这提示着精液mt-cfDNA 浓度或因生精障碍而降低，其浓度升高则可能进一步加重损伤。此外，Javier等研究发现，男性脊髓损伤患者的精浆cfDNA片段化显著增高，且长度为150bp的cfDNA片段可抵抗精液中DNA酶活性而难以被分解。

而对于不稳定的低分子cfDNA片段，其浓度与精子的曲线速度、形态质量和获能指数呈正相关，且在精液冷冻过程占比下降。对于精液cfDNA进行的甲基化分析结果则证实，精液cfDNA可反映睾丸组织的表观遗传信息，且CCNA1和DMＲT1基因甲基化水平与非梗阻无精子症患者取精率显著相关。上述结论表明精液cfDNA浓度与其片段长度可反映精子状态和精液质量，而其甲基化特征亦可反映睾丸功能并可作为取精率的预测指标。

出自《循环游离DNA在辅助生殖技术中的研究进展》作者刘小童，周星宇，张笑菲。